A. 電泳技術的廣泛應用
電泳技術還廣泛應用於食品檢測、環境保護等方面,和人們的生活息息相關。
電泳技版術的廣泛使權用,促使各大專院校和中等專科學校急切培養大批電泳技術人才,以滿足社會需要,所以電泳又成為不可缺少的教學科研手段。
實驗室教學常用電泳技術:紙上電泳和醋酸纖維素薄膜電泳 、瓊脂及瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯醯胺凝膠電泳。
B. 簡述電泳原理及影響因素對電泳有何影響
原理是電泳材料比如DNA
RNA
蛋白質帶電荷
在電場中可以遷移
影響因素有材料中雜質
電壓
電泳時間等
雜質可導致跑出來的條帶無法分辨
電壓不穩
過高過低
電泳時間過長
過短都會使跑出來的膠達不到理想效果
C. 電泳技術綜述主要是原理和應用
電泳技術,是指在電場作用下,帶電顆粒在由於所帶的電荷不同以及分子大小差異而有不同的遷移行為從而彼此分離開來的一種實驗技術。
許多生物分子都帶有電荷,其電荷的多少取決於分子結構及所在介質的pH值和組成。由於混合物中各種組分所帶電荷性質、電荷數量以及相對分子質量的不同,在同一電場的作用下,各組分泳動的方向和速率也各異。因此,在一定時間內各組分移動的距離也不同,從而達到分離鑒定各組分的目的。
電泳技術主要用於分離各種有機物(如氨基酸、多肽、蛋白質、脂類、核苷酸、核酸等)和無機鹽;也可用於分析某種物質純度,還可用於分子量的測定。電泳技術與其他分離技術(如層析法)結合,可用於蛋白質結構的分析,「指紋法」就是電泳法與層析法的結合產物。用免疫原理測試電泳結果,提高了對蛋白質的鑒別能力。電泳與酶學技術結合發現了同工酶,對於酶的催化和調節功能有了深入的了解。所以電泳技術是醫學科學中的重要研究技術。
紙電泳和醋酸纖維薄膜電泳
紙電泳用於血清蛋白質分離已有相當長的歷史,在實驗室和臨床檢驗中都曾經廣泛應用。自從1957年Kohn首先將醋酸纖維薄膜用作電泳支持物以來,紙電泳已被醋酸纖維薄膜電泳所取代。因為後者具有比紙電泳電滲小、分離速率快、分離清晰、血清用量少以及操作簡單等優點。
瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂經處理去除其中的果膠成分即為瓊脂糖。由於瓊脂糖中硫酸根含量較瓊脂為少,電滲影響減弱,因而使分離效果顯著提高。例如血清脂蛋白用瓊脂凝膠電泳只能分出兩條區帶(α-脂蛋白、β-脂蛋白),而瓊脂糖凝膠電泳可將血清脂蛋白分出三條區帶(α-脂蛋白、前β-脂蛋白和β-脂蛋白)。所以瓊脂糖為較理想的凝膠電泳的一種材料。
血清中的脂類物質與載脂蛋白結合成水溶性的脂蛋白形式存在,各種脂蛋白中所含的載脂蛋白種類和數量不同、脂蛋白顆粒大小不同等因素,使它們在電場中的移動速率各異,因而可以通過電泳達到分離。
聚丙烯醯胺凝膠電泳
聚丙烯醯胺凝膠是一種人工合成的凝膠,具有機械強度好、彈性大、透明、化學穩定性高、無電滲作用、設備簡單、樣品量小(1~100ug)、解析度高等優點,並可通過控制單體濃度或單體與交聯劑的比例,聚合成不同孔徑大小的凝膠,可用於蛋白質、核酸等分子大小不同的物質的分離、定性和定量分析。還可結合解離劑十二烷基硫酸鈉(SDS),以測定蛋白質亞基的相對分子質量
電泳原理:
電泳是電泳塗料在陰陽兩極,施加於電壓作用下,帶電荷之塗料離子移動到陰極,
並與陰極表面所產生之鹼性作用形成不溶解物,沉積於工件表面。
它包括四個過程:
1 )電解(分解)
在陰極反應最初為電解反應,生成氫氣及氫氧根離子 OH ,此反應造成陰極面形成
一高鹼性邊界層,當陽離子與氫氧根作用成為不溶於水的物質,塗膜沉積,方程式
為: H2O→OH+H
2 )電泳動(泳動、遷移)
陽離子樹脂及 H+ 在電場作用下,向陰極移動,而陰離子向陽極移動過程。
3 )電沉積(析出)
在被塗工件表面,陽離子樹脂與陰極表面鹼性作用,中和而析出不沉積物,沉
積於被塗工件上。
4 )電滲(脫水)
塗料固體與工件表面上的塗膜為半透明性的,具有多數毛細孔,水被從陰極塗
膜中排滲出來,在電場作用下,引起塗膜脫水,而塗膜則吸附於工件表面,而
完成整個電泳過程。
D. 電泳漆的歷史
20世紀80年代,由於美國、日本、德國等許多塗料公司的不懈開發,陰極電泳塗料最版有代表性的是厚權膜型陰極電泳塗料、低溫固化型陰極電泳塗料及彩色陰極電泳塗料。20世紀80年代末期,國際上形成了三大體系:以美國PPG公司為開端的防銹蝕陽離子型電泳塗料;以德國Hoechst公司為先驅的轎車、卡車用陽離子型電泳底漆;以日本神東、關西塗料公司為代表的改進型陽離子電泳塗料。
從 20 世紀 90 年代開始,歐美汽車廠為環保達標採用環保型汽車塗料替代傳統的有機溶劑型汽車塗料。到 2001 年已採用水性中塗、底色漆的轎車分別已佔總產量的份額為:北美7%和43%;歐洲32.5%和36% 。其中德國已基本實現水性化,中塗佔80%,底色漆占 93%。
E. 什麼是電泳技術
電泳是指混懸於溶液中的樣品(有機的或無機的,有生命的或版無生命的)電荷顆權粒,在電場影響下向著與自身帶相反電荷的電極移動的現象。利用電泳現象的電泳技術是一種先進的檢測手段,與其他先進技術相配合,可以創造出驚人的成果,使人們用較少代價獲得較大效益。電泳技術廣泛應用在理論研究、農業科學、醫葯衛生、工業生產、食品檢測、環保等許多領域。
F. 電泳法的基本原理
不同帶電粒子因所帶電荷不同,或雖所帶電荷相同但荷質比不同,在同一電場中電泳,經一定時間後,由於移動距離不同而相互分離。分開的距離與外加電場的電壓與電泳時間成正比。
在外加直流電源的作用下,膠體微粒在分散介質里向陰極或陽極作定向移動,這種現象叫做電泳。
一般來講,金屬氫氧化物、金屬氧化物等膠體微粒吸附陽離子,帶正電荷;非金屬氧化物、非金屬硫化物等膠體微粒吸附陰離子,帶負電荷。
因此,在電泳實驗中,氫氧化鐵膠體微粒向陰極移動,三硫化二砷膠體微粒向陽極移動。利用電泳可以分離帶不同電荷的溶膠。
(6)簡述電泳技術的發展歷史擴展閱讀
應用
電泳已日益廣泛地應用於分析化學、生物化學、臨床化學、毒劑學、葯理學、免疫學、微生物學、食品化學等各個領域。在直流電場中,帶電粒子向帶符號相反的電極移動的現象稱為電泳。
1807年,由俄國莫斯科大學的斐迪南·弗雷德里克·羅伊斯(Ferdinand Frederic Reuss)首先發現了電泳現象,但直到1937年瑞典的Tiselius建立了分離蛋白質的界面電泳(boundary electrophoresis)之後,電泳技術才開始應用。
上世紀60-70年代,當濾紙、聚丙烯醯胺凝膠等介質相繼引入電泳以來,電泳技術得以迅速發展。豐富多彩的電泳形式使其應用十分廣泛。
G. 電泳原理及電泳八大系統詳解
1.電泳技術的臨床應用及進展
最早期的界面電泳(Moving Boundary),開創了電泳技術的新紀元,區帶電泳技術(Zone electrophoresis)是在臨床檢驗領域中應用最廣泛的技術,也是與臨床密切結合的一種技術,現已從手工操作向自動化方向發展,並結束了電泳要用緩沖液的歷史,使電泳技術又進入了一個新的里程碑。現就八大常用技術作一簡述。
血清蛋白電泳
新鮮血清經電泳後可精確地描繪出患者蛋白質的全貌,有助於許多臨床疾病判斷的參考,在各類教材書上已清晰的描述了各種病理現象所顯現的圖像,一般常見的是白蛋白降低,某個球蛋白區域升高,提示不同的臨床意義。如球蛋白多克隆(poly-clonal)增高,β-γ融合的橋連現象,在γ區呈現細而密的寡克隆(oligoclonal)區帶,及由單一克隆漿細胞異常增殖所產生的單克隆(monoclonal)免疫球蛋白區帶,又稱M蛋白(Monoclonal Protein)帶,血清蛋白電泳是其首選的實驗診斷方法。
免疫固定電泳
血清免疫固定電泳(Immunofixation, IF)技術是血清蛋白質在瓊脂糖凝膠介質上經電泳分離後,應用蛋白質固定劑和各型免疫球蛋白及其輕鏈抗血清,加於凝膠表面的泳道上,經孵育和擴散後,若有對應的抗原存在,則在適應位置形成抗原抗體復合物並沉澱下來。染色後蛋白質電泳參考泳道和抗原抗體沉澱區帶被氨基黑著色,根據電泳移動距離分離出單克隆組份,可對各類免疫球蛋白及其輕鏈進行分型。血清免疫固定電泳技術用於M蛋白的型、亞型和輕鏈型,本周(Bence-Jonse)蛋白和游離輕鏈的分型和鑒別。
同工酶電泳
血清乳酸脫氫酶同工酶電泳
血清肌酸激酶及其亞型同工酶電泳
血清鹼性磷酸酶同工酶電泳
血清鹼性磷酸酶同工酶電泳具有三種不同結構的基因編碼或在轉移後修飾的結果,按其氨基酸序列可分為小腸型、胎盤型和組織非特異型(肝、腎、骨),它們各自表達產物可在血清中呈現,具有不同的意義。利用麥胚凝集素(wheat germ agglutinin, WGA)與ALP-L1和ALP-B糖鏈親和力的不同,血清與WGA作用再經電泳後可將ALP同工酶予以分離。肝外膽道阻塞轉移肝癌時,高分子ALP(ALP-L2)明顯增高,在原發性肝癌時肝型ALP(ALP-L1)明顯增高,骨轉移性癌時ALP-B增高。
脂蛋白電泳
應用自動電泳系統可將血清中脂蛋白組份進行分離,呈現LDL、VLDL和HDL條帶,輸入TC值,計算各種脂蛋白中膽固醇含量,LDL-C/HDL-C比值在正常人群組與冠心病患者組存在顯著差異(p<0.001);診斷臨界值(cut-off point)為3.89,診斷靈敏度76.7%,特異性79.8%。LDL-C/HDL-C比值是粥樣硬化性冠脈疾病重要的危險因子之一,明顯優於膽固醇或其它血脂的單個含量指標,且隨比值的增加,患冠脈疾病的危險性相應增大。
在凝膠中脂蛋白的等電點不同,不僅可區分α,前β和β區帶,又因介質中含有抗LP(a)抗體及陽離子存在,抗LP(a)抗體與患者血清中LP(a)結合形成復合物,陽離子則抑制其它脂蛋白的泳動速度,LP(a)便與其它脂蛋白分離開來。清晰的LP(a)條帶呈現在前β與γ區域之間,陽性條帶掃描後,可獲得區帶的面積及其百分含量,提高了對心、腦血管獨立的危險因子LP(a)檢測的敏感性和特異性。
血紅蛋白電泳
血紅蛋白電泳可使正常血紅蛋白HbA與HbA2分離,也可檢測出大部分異常血紅蛋白如:HbS、HbD、HbC和HbE。當HbA2、HbC和HbE>20%時,則難以分離和鑒別。應先用鹼性瓊脂糖凝膠血紅蛋白電泳進行正常和異常血紅蛋白的分離和檢測,通常用於孕婦的篩選,然後再進行酸性瓊脂糖凝膠血紅蛋白電泳,對異常血紅蛋白予以分離和鑒別。
血紅蛋白遺傳性分子病常分為異常Hb病和地中海貧血兩大類。異常Hb病如鐮狀細胞貧血,在鹼性緩沖液中異常HbS電泳區帶的位置呈現在HbA與HbA2之間,異常血紅蛋白的HbC和HbE電泳遷移率都十分緩慢,HbC和HbA2可重疊。在PH6.2的枸櫞酸緩沖液的是瓊脂糖介質電泳中,由於HbC不能與HbA分離,這樣就可檢測出HbE。異常血紅蛋白HbD是在鹼性緩沖液中其電泳遷移率如同HbS,而在PH6.2枸櫞酸緩沖液的瓊脂糖介質中,因HbS與HbA不能分離,這樣就可以分離和檢測出HbD。β-地中海貧血是HbA的合成受損,電泳圖譜可呈現HbA2與HbF區帶。
糖化血紅蛋白電泳
非濃縮尿蛋白電泳
腦脊液電泳
H. 電泳技術
電泳技術是一種先進的檢測手段,與其它先進技術相配合,能創造出驚人的成果,可使人們用較少代價獲得最優效益。比如它對解決當前人類所面臨的食品、能源、環境和疾病等一系列迫切問題,都有積極作用,顯示出強大的生命力。因此電泳技術正越來越多地為人們所重視,廣泛應用於各個領域。
技術原理
電泳是指混懸於溶液中的樣品(有機的或無機的,有生命的或無生命的)電荷顆粒,在電場影響下向著與自身帶相反電荷的電極移動的現象。眾所周知,目前最先進的電腦和最精巧的機器人,也難以和螞蟻的精巧 程度相比。而且螞蟻還能傳宗接代,更是現代技術所望塵莫及的。而螞蟻的這些特性與核酸和蛋白質的結構與功能是分不開的。核酸(包括脫氧核糖核酸和核糖核酸)可降解成片段,還可進一步降解成核苷酸;蛋白質(包括酶和同工酶)多肽和氨基酸等都具有可電離的基團,基團在溶液中能吸收或者給出氫離子,從而成為電荷粒子;又由於電荷粒子的多少不等以及具有相同電荷的分子又有大有小,於是在不同的介質中,在電場影響下,它們移動的速度也不相同了。人們利用這種特性,用電泳的方法對上述物質進行定性及定量分析,或者將一定的混合物分離成各個組份以及作少量電泳制備。因為電泳技術的這種獨特功能,所以就成了分子生物學研究工作中不可缺少的重要分析手段,被廣泛應用於基礎理論研究、農業科學、醫葯衛生、工業生產、國防科研、法醫學和商檢等許多領域。
I. 電泳技術的技術原理
電泳是指來混懸於溶液中的樣品(有源機的或無機的,有生命的或無生命的)電荷顆粒,在電場影響下向著與自身帶相反電荷的電極移動的現象。眾所周知,目前最先進的電腦和最精巧的機器人,也難以和螞蟻的精巧 程度相比。而且螞蟻還能傳宗接代,更是現代技術所望塵莫及的。而螞蟻的這些特性與核酸和蛋白質的結構與功能是分不開的。核酸(包括脫氧核糖核酸和核糖核酸)可降解成片段,還可進一步降解成核苷酸;蛋白質(包括酶和同工酶)多肽和氨基酸等都具有可電離的基團,基團在溶液中能吸收或者給出氫離子,從而成為電荷粒子;又由於電荷粒子的多少不等以及具有相同電荷的分子又有大有小,於是在不同的介質中,在電場影響下,它們移動的速度也不相同了。人們利用這種特性,用電泳的方法對上述物質進行定性及定量分析,或者將一定的混合物分離成各個組份以及作少量電泳制備。因為電泳技術的這種獨特功能,所以就成了分子生物學研究工作中不可缺少的重要分析手段,被廣泛應用於基礎理論研究、農業科學、醫葯衛生、工業生產、國防科研、法醫學和商檢等許多領域。
J. 電泳技術是什麼
電泳技術是一種先進的檢測手段,與其它先進技術相配合,能創造出驚人的成果版,可使權人們用較少代價獲得最優效益。比如它對解決當前人類所面臨的食品、能源、環境和疾病等一系列迫切問題,都有積極作用,顯示出強大的生命力。因此電泳技術正越來越多地為人們所重視,廣泛應用於各個領域。你可以參考這里:http://ke..com/view/9183.htm